有机残留物考古的GC-MS分析流程研究

来源:中国文物报
作者:路亚楠 郝娇娇

有机残留物考古是通过分析考古遗存中附着的有机分子,重建古代人类活动与环境的一门新兴交叉学科。这些残留物包括脂质、蛋白质、淀粉、树脂、蜡等有机分子,它们以肉眼不可见的形式存在于陶器孔隙、石器表面、牙结石、土壤沉积等载体中。

有机残留物分析如今已成为考古学中的一项成熟学科,越来越多的考古学家开始将有机残留物分析纳入他们的众多科学手段之中。该领域的重大发展得益于20世纪中叶出现的新一代分析方法,如红外、拉曼等光谱方法;同时期,能够实现分子层面分析的色谱方法也应运而生,20世纪50年代末,气相色谱(GC)与质谱(MS)相结合后,使得复杂生物和环境材料的各个成分能够分离并鉴定,从而使得材料成分的来源能够明确辨别。

20世纪70年代初‌,瑞士学者利用GC-MS分析了亚马逊盆地印第安部落制作的致幻性饮料“死藤水”,这是该技术在考古研究中较早的应用案例。我国直至21世纪10年代才将其应用于考古遗存分析,此后逐步进入发展期。2005年,我国开始有关于GC-MS法进行残留物考古实验方法的报道,介绍了彩绘层中粘合剂成分检测的仪器分析条件、称样量、衍生化试剂,并通过结果分析确定粘合剂为桐油。

近年来,随着检测手段的不断完善,GC-MS凭借高分离效率、高灵敏度及精准定性定量能力,在有机残留物考古中的应用日益普遍,成为我国有机残留物分析的重要手段;裂解气相色谱-质谱联用技术(Py-GC-MS)则针对难挥发、高分子量有机残留物,通过热裂解转化为易挥发组分后再进行分析,弥补了GC-MS的应用局限。姚娜等明确了仪器条件,通过对战国墨检测数据的分析,确定其为松烟墨;付迎春等对蛋白质类胶结材料分析过程中的仪器条件、样品量、衍生试剂均进行了介绍,并使用主成分分析法(PCA)对数据进行了解读;王桢等进行了蜂蜡残留物分析,梳理了样品处理和成分分析方法;赵金丽等建立了针对墓葬壁画中蛋清鉴别的Py-GC-MS分析方法;张欣雨等采用Py-GC-MS和THM-Py-GC-MS分析,根据裂解产物中特定的主要和次要化合物含量,成功区分油画用黏结剂和添加剂。

‌尽管GC-MS与Py-GC-MS技术在有机残留物考古领域的应用与研究成果不断增多,但目前学界针对有机残留物考古完整实验流程的系统性介绍仍较为匮乏。本文结合GC-MS与Py-GC-MS两种仪器,系统梳理有机残留物考古的完整分析流程。

标本采集。炭块、油脂、皮革、织物等标本需非破坏性取样,将表面浮土清洁干净后可直接取样,必要时在显微镜下操作。对于表面残留物、漆皮、彩绘、容器内容物、牙结石等标本使用表面刮取法,用洁净手术刀片轻刮物体表面,将粉末收集于预灼烧铝箔或玻璃容器中。对于无表面沉积物的陶器、石器等采用微钻孔取样法,使用洁净钻头,在器物目标位置钻取少量粉末。

陶器样品在底部、下腹部、内壁、口沿分别取样;带流嘴的器物在流嘴内部采样;漆皮等分层的标本,需逐层采样分别分析。在器物紧邻处、同层远离器物处、上下层位系统采集土壤,用于区分器物使用残留与埋藏环境引入的有机物。

前处理方法。称取粉末样品,放入离心管中。加入已知浓度的内标物,进行溶剂萃取。将提取液浓缩后用GC-MS分析。必要时,可采用固相萃取法纯化萃取液。对于酒类、树脂、蛋白质等样品,需进行衍生化处理,常用试剂为N,O-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺(BSTFA)。

仪器方法。GC-MS法和Py-GC-MS法色谱条件相同,通常色谱柱选用DB-5MS毛细管柱;离子源为电子轰击离子源;采用全扫描模式进行定性分析,选择离子监测模式进行定量分析。裂解条件为裂解温度500-800℃。Py-GC-MS法定量多采用内标法,若只需相对定量,可采用面积归一法。

数据分析。数据分析以标志物识别、来源判别、统计归类为核心,将色谱质谱信号转化为可考古解读的信息。图谱预处理。完成基线校正、背景扣除、峰识别与积分,剔除假峰干扰,获取峰面积、保留时间等参数。组分定性分析。GC-MS以NIST谱库匹配为主,结合保留时间与特征离子确认;Py-GC-MS依据裂解指纹图谱,结合NIST与F-search库,判别胶料、油脂、多糖、树脂等。组分定量分析。GC-MS采用外标或内标法以特征离子定量。Py-GC-MS由于裂解产物复杂,多采用内标半定量,通过峰面积与浓度比值获取相对含量。

考古学解释

将有机残留物的检测结果转化为考古学解释,是进行残留物考古研究的最终目标和核心价值。

来源判别。以特征化合物比值模型为核心,实现脂类、胶料、树脂、油饰等来源判别。常用判别指标包括:C16:0/C18:0区分动物脂肪与植物油;支链/直链脂肪酸、ΣC15+C17/ΣC16+C18区分反刍/非反刍动物;C18:2/C16:0区分植物油和动物脂肪;C18:3/C18:2区分亚麻油与其他植物油等。

统计分析。主成分分析(PCA):对脂肪酸等多维数据降维,快速揭示样品聚类趋势,区分动植物来源、器物用途差异。聚类分析(HCA):按化学组成相似度分组,揭示遗址内部不同类型残留物、功能分区等情况。相关性分析:主要用于验证假设、揭示影响因素,辅助探究残留物保存状况与埋藏环境参数相关性。

结论与展望

有机残留物考古作为科技考古的重要分支,已从早期“发现成分”阶段,逐步走向“解读行为”的研究,为揭示古代人类的技术传统、资源利用、社会结构等提供了科学依据。其中,GC-MS与Py-GC-MS作为重要分析手段,其流程的规范化与精细化,成为推动该领域发展的重要支撑。

一是建立全流程操作规程。当前有机残留物考古研究中,不同实验室的采样、前处理、检测及数据分析存在差异,导致研究结果的可比性不足,制约了跨遗址、跨区域研究结果的比对与整合。为此,需构建覆盖全流程的标准体系,统一采样标准,避免采样过程中造成残留物污染或损耗;规范前处理流程,减少人为操作误差;统一衍生试剂的种类、用法等,确保目标化合物高效衍生;标准化仪器参数,针对不同类型残留物优化色谱条件,保障检测结果稳定性;明确质控指标,设置空白对照、平行样、回收率等质控环节,确保数据可靠性;规范化合物定量方法等内容,推动有机残留物分析方法的统一化、规范化发展,为跨区域、跨时段研究提供统一标准。

二是提高灵敏度与抗干扰能力。有机残留物多存在于器物缝隙、土壤基质中,含量低、组分复杂、易受环境干扰,传统检测技术难以实现超微量残留物的精准分析。未来需推广先进检测技术,包括微萃取技术,通过固相微萃取等方法,富集微量残留物,减少基质干扰;自动化前处理技术,借助自动化设备完成样品提取、净化、衍生等流程,降低人为误差;高分辨质谱技术,凭借更高的质量分辨率与准确度,实现复杂基质中微量目标的精准鉴定与定量,例如全二维气相色谱-飞行时间质谱(GC×GC-TOF-MS)技术,其高分离能力,可以有效解决复杂有机残留物中组分重叠的问题,实现对超微量、复杂基质样品的分析。

三是推动多技术交叉融合。单一的GC-MS与Py-GC-MS技术仅能完成残留物的成分鉴定,难以满足从来源、迁移到埋藏的全过程解析的研究需求。需进行多技术交叉融合,与单体同位素分析结合,通过测定残留物中不同化合物的同位素组成,追溯原料来源与古环境;与红外光谱、拉曼光谱联用,快速识别残留物的官能团与分子结构,辅助成分鉴定;融合分子生物学技术,检测残留物中的同位素、DNA等信息,揭示古代人类的饮食结构、疾病状况等,推动有机残留物考古从成分鉴定向全过程解析转变,实现对古代人类行为的多维度解读。

四是建设共享数据库。当前我国有机残留物考古数据较为分散,缺乏统一的数据库平台。Prévost C等人组织构建了国际有机残留物考古文献数据库(AROLD),旨在系统整理已发表的考古脂质分析数据,以解决文献分散和异质性问题。我国可参照相关建设经验,构建符合我国考古实际的有机残留物考古数据库,整合不同遗址、不同时代、不同类型的残留物数据,建立数据更新与共享机制,鼓励科研机构上传研究数据,实现数据资源互通;依托数据库开展区域比较研究,分析不同区域的饮食方式、生活模式等差异,探讨古代人类的迁徙、文化交流与社会发展规律,为宏观考古研究提供数据支撑。

综上,有机残留物考古的发展已进入新阶段,GC-MS与Py-GC-MS技术的规范化、精细化与智能化,结合全流程标准建设、技术交叉融合与共享数据库构建,将持续推动科技考古与传统考古的深度融合,为我们更全面、更深入地揭示古代人类文明的发展脉络提供重要科学证据。

(作者单位:河北省文物考古研究院)

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